Nano-frFAST: ДИЗАЙН НОВОЙ ГЕНЕТИЧЕСКИ КОДИРУЕМОЙ ДАЛЬНЕ-КРАСНОЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ МЕТКИ

Аннотация:

Предложен новый флуороген-активирующий белок nano-frFAST, содержащий всего 98 аминокислот, на основе комбинации ранее созданных флуороген-активирующих белков nanoFAST и frFAST. Синтезирована серия флуорогенов с увеличенной системой сопряженных связей, потенциально способных к связыванию с данным белком. По результатам исследования выявлен перспективный флуороген - (Z)-5-((Е)-3-(4-гидрокси-2,5-диметоксифенил)аллилиден)-2-тиоксотиазолидин-4-он (HPAR-DOM). Показано, что комплекс nano-frFAST-HPAR-DOM может быть использован в качестве генетически кодируемой дальне-красной флуоресцентной метки для окрашивания отдельных структур живых клеток. Особой популярностью пользуются генетически кодируемые метки, которые вводятся в исследуемые объекты методами молекулярной генетики. Один из вариантов таких меток - флуороген-активирующие белки, активно используемые рядом коллективов по всему миру. Такие белки не флуоресцентны сами по себе, поэтому требуют наличия в системе особого соединения - низкомолекулярного флуорогена. Флуоресценция свободных флуорогенов в растворах также незначительна, однако, обратимо связываясь с карманом флуороген-активирующего белка, флуорогены переходят в высокофлуоресцентную форму. В отличие от классических генетически кодируемых флуоресцентных меток, основанных на флуоресцентных белках, флуороген-активирующие белки не зависят от присутствия в системе кислорода и не имеют этапа созревания, который в случае флуоресцентных белков может длиться в течение нескольких десятков минут или даже часов.

Авторы:

Издание: Биоорганическая химия
Год издания: 2025
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2025.-N 1.-С.144-152. Библ. 19 назв.
Просмотров: 2