СОЗДАНИЕ КЛЕТОЧНЫХ МОДЕЛЕЙ СО СТАБИЛЬНОЙ ЭКСПРЕССИЕЙ ФЛЮОРЕСЦЕНТНОГО СЕНСОРА АКТИВНОСТИ КАСПАЗЫ-З

Аннотация:

Создан лентивирусный вектор для инсерции коммерческого флюорогенного протеазного биосенсора каспазы-3 — ZipGFP-Casp3 — в клеточные культуры. В качестве целевых культур для изучения особенностей апоптоза были выбраны три культуры мезенхимных стволовых клеток (МСК) из печени и плаценты, культура дермальных фибробластов, а также клоны стабильных линий колоректальной карциномы НТ-29 и Сасо2 с нокаутом главного маркера раковых столовых клеток CD133 и контрольные клоны этих двух линий. Все культуры были трансдуцированы сенсором ZipGFP-Casp3, клетки с прошедшей трансдукцией были отсортированы и в части выведенных культур были отмечены клетки, спонтанно уходящие в апоптоз и демонстрирующие стойкую флюоресценцию GFP. Кроме того, были проведены эксперименты по изучению чувствительности трансдуцированных флюорогенным сенсором каспазы-3 МСК плаценты, а также клона линии НТ-29 с нокаутом CD133 и контрольного клона этой линии к классическим индукторам апоптоза — стауроспорину и TRAIL. Полученные результаты позволяют утверждать, что выведенные клеточные культуры являются хорошими моделями для изучения апоптоза в культурах МСК и в популяции раковых стволовых клеток.

Авторы:

Издание: Клеточные технологии в биологии и медицине
Год издания: 2025
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2025.-N 1.-С.60-68. Библ. 26 назв.
Просмотров: 1