Получение конъюгатов на основе наночастиц коллоидного золота для быстрого выявления антител к вирусу гепатита Е

Аннотация:

Вирус гепатита Е (ВГЕ) — частая причина вирусных гепатитов не только на территориях с низким уровнем водоснабжения и гигиены, но и в промышленно развитых странах. Важнейшей проблемой совершенствования системы диагностики гепатита Е остаётся разработка тестов быстрого определения серомаркеров инфекции для применения в условиях отсутствия специального оборудования и обученного персонала. Цель работы — получение конъюгатов наночастиц коллоидного золота (НЧЗ) нескольких размеров с рекомбинантным антигеном ORF2 ВГЕ 3-го генотипа и оценка возможности их применения в иммуноанализе для выявления антител к ВГЕ. Материалы и методы. Исследовали специфические поликлональные и моноклональные антитела, рекомбинантный антиген ОRF2 ВГЕ 3-го генотипа, образцы сывороток крови людей с диагнозом острого гепатита. Осуществляли синтез НЧЗ и их конъюгатов с рекомбинантным антигеном, иммуноферментный анализ, дот-иммуноанализ, иммунохроматографический анализ, использовали метод просвечивающей электронной микроскопии. Результаты. Цитратным методом с использованием различных концентраций восстановителя синтезированы 3 препарата НЧЗ. На их основе получены конъюгаты с рекомбинантным антигеном ОRF2 ВГЕ 3-го генотипа, иммунореактивность которых подтверждена методом дот-иммуноанализа с образцами сывороток крови, содержащими специфические иммуноглобулины класса G (IgG). Для применения в иммунохроматографическом анализе отобран конъюгат на основе НЧЗ диаметром 41 нм. Отработаны условия получения мультимембранного композита, включая формирование аналитической и контрольной линий и зоны конъюгата, изготовлены тест-полоски и проведены испытания полученного конъюгата методом иммунохроматографического анализа с образцами сывороток крови, предварительно охарактеризованными по содержанию IgG-антител к ВГЕ. Показана высокая иммунореактивность полученного конъюгата: антитела к вирусу выявлены в 100% обследованных IgG-положительных проб сывороток (п=17) и не обнаружены в отрицательных пробах (п=17). Выводы. Получены иммунореагенты (рекомбинантный антиген, антитела, конъюгат), которые могут быть использованы при создании тест-систем для экспресс-диагностики ВГЕ.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2025
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2025.-N 1.-С.7-17. Библ. 39 назв.
Просмотров: 2