Интенсивность дегрануляции и лизиса гранулоцитов крови человека при взаимодействии с Yersinia pestis на модели бактериемии ex vivo

Аннотация:

С учётом решающей роли антибактериальных стратегий секреторной дегрануляции и нетоза в предотвращении сепсиса, представляет интерес изучение взаимодействия Yersinia pestis с гранулоцитами крови человека на модели бактериемии ex vivo для оценки эффективности этих стратегий при чуме. Цель работы — оценка дегрануляции и лизиса гранулоцитов в образцах цельной крови человека в присутствии живых Y. pestis. Материалы и методы. Бактериемию моделировали добавлением в цельную кровь (с гепарином) клеток аттенуированного штамма Y. pestis EV НИИЭГ, выращенных при 37°С либо 28°С, в дозе 10 в 8 м.к./мл. Штаммы Staphylococcus aureus АТСС 6538 (209-Р) и Escherichia coli АТСС 25922 использовали в опытах с кровью тех же доноров в качестве положительного контроля. Бактерицидный эффект определяли в различные сроки инкубации крови при 37°С (в течение 6 ч) микробиологическим методом. С помощью проточной цитометрии в крови проводили иммунофенотипирование лейкоцитов по Lyse/No-Wash протоколу для определения экспрессии на поверхности гранулоцитов основного лейкоцитарного антигена CD45 и маркера секреторной азурофильной дегрануляции CD63. Интенсивность лизиса гранулоцитов оценивали по снижению доли этих клеток в суммарной лейкоцитарной популяции. Результаты. Установлено, что живые клетки чумного микроба, в отличие от Е. coli и S. aureus, не приводят к развитию азурофильной дегрануляции в гранулоцитах крови человека и в течение 6 ч не индуцируют аутолизис (нетоз) этих клеток при моделировании бактериемии ex vivo. Заключение. На модели чумной бактериемии ex vivo впервые получена информация, свидетельствующая о том, что в крови не привитых против чумы людей не работают механизмы внеклеточной бактерицидности гранулоцитов, эффективно функционирующие в условиях бактериемии в отношении Е. coli и S. aureus. Подготовлена экспериментально-методическая основа для дальнейших исследований с клетками крови привитых против чумы доноров с целью разработки новых эффективных тестов оценки напряжённости приобретённого клеточного противочумного иммунитета.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2025
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2025.-N 1.-С.80-90. Библ. 40 назв.
Просмотров: 0