picoFAST - НОВАЯ ГЕНЕТИЧЕСКИ-КОДИРУЕМАЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ МЕТКА

Аннотация:

Получена новая генетически кодируемая флуоресцентная метка picoFAST, которая содержит всего 88 а.о. и на данный момент выступает наименьшим флуороген-активирующим белком. Показано, что комплекс белка picoFAST с флуорогеном HBR-DOM2 может быть использован в качестве генетически-кодируемой флуоресцентной метки для окрашивания отдельных структур живых клеток. Уменьшение размера генетически-кодируемых меток, используемых для визуализации экспрессии гетерологичных или модифицированных белков в живых клетках и тканях, - одна из приоритетных задач современных исследований. В первую очередь это необходимо для минимизации влияния метки на функционирование меченого белка. Однако еще более важным уменьшение размера метки становится в тех случаях, когда длина кодирующей последовательности оказывается ограничена способом доставки соответствующей ДНК в клетки, например, при использовании адено-ассоциированных вирусов (Adеno-associated viruses, AAV). AAV крайне привлекательны как способ доставки ДНК, т.к. они обладают низкой иммуногенностью, при конструировании вирусных частиц могут быть использованы различные серотипы белков капсида, которые определяют их специфичность к заражению определенных типов клеток, а их генетический материал не встраивается в ДНК хозяина. Кроме того, AAV относятся к организмам первого уровня биологической безопасности, т.е. они практически безопасны для здорового человека, применяющего в работе с ними минимальные средства защиты. Основное ограничение в использовании AAV - ограниченная емкость вирусного капсида, способного вмещать в себя ~4.7 т.п.н. Нуклеотидная последовательность, кодирующая классические флуоресцентные белки, состоит из более чем 700 п.н., а масса соответствующей белковой молекулы составляет 27 кДа. Структуры флуоресцентных белков крайне консервативны, поэтому значительное уменьшение их размера не представляется возможным.

Авторы:

Издание: Биоорганическая химия
Год издания: 2025
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2025.-N 2.-С.300-307. Библ. 26 назв.
Просмотров: 2