МОНОКЛОНАЛЬНОЕ АНТИТЕЛО ПРОТИВ ОЛИГОМЕРНОЙ ФОРМЫ БОЛЬШОГО С-КОНЦЕВОГО ФРАГМЕНТА (Met225-Ile412) ГЕМОЛИЗИНА II Bacillus cercus СПОСОБНО ШТАММ-СПЕЦИФИЧЕСКИ ПОДАВЛЯТЬ ГЕМОЛИТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ

Аннотация:

Порообразующий токсин гемолизин II (Hlyll), секретируемый грамположительной бактерией Bacillus cereus, - один из основных патогенных факторов данного микроорганизма. Действие HlyII приводит к лизису клеток вследствие порообразования на мембранах. Гибридомной технологией получены моноклональные антитела против большого С-концевого фрагмента (Met225-Ile412, HlyIILCTD) HlyII В. cereus с использованием в качестве антигена рекомбинантной растворимой формы HlyIILCTD, которую получали с использованием белка-шаперона SlyD. Моноклональное антитело LCTD-83 ингибировало гемолитическую активность HlyII, степень защиты зависела от присутствия/отсутствия пролина в положении 324 в первичной последовательности токсина. Наиболее эффективно антитело ингибировало гемолиз эритроцитов, вызванный HlyII В-771, в последовательности которого в положении 324 присутствует Pro вместо Leu. Показано, что антитело LCTD-83 взаимодействует с образовавшимися порами на мембранах эритроцитов, блокируя при этом возможный выход внутриклеточного содержимого. HlyII и его мутантные формы получали с использованием рекомбинантных штаммов-продуцентов Escherichia coli BL21(DE3). Способность антител узнавать антигены характеризовали иммуноферментным анализом (ИФА) и иммуноблоттингом, иммунопреципитацию использовали для демонстрации взаимодействия с мембранными порами, сформированными токсином. LCTD-83 менее эффективно взаимодействовало с полноразмерным токсином, чем с HlyIILCTD, что подтвердило тот факт, что порообразование сопровождается изменением конформации токсина. В связи с этим для подавления цитолитического действия гемолизина II перспективны антитела, взаимодействующие с его олигомерной формой. LCTD-83 обладает потенциалом при выявлении путей нейтрализации токсина.

Авторы:

Издание: Биоорганическая химия
Год издания: 2025
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2025.-N 2.-С.342-351. Библ. 36 назв.
Просмотров: 1