Регенеративная активность обогащенной тромбоцитами плаза крови в различных возрастных группах

Аннотация:

Цель исследования. Изучение в возрастном аспекте регенеративного потенциала обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP) in vitro в культуре клеток дермальных фибробластов с оценкой пролиферативной, миграционной и метаболической активности клеток после их стимуляции PRP доноров разного возраста. Материал и методы. Для приготовления PRP использовали один из классических протоколов одноэтапного центрифугирования цельной крови условно здоровых доноров, разделенных на возрастные группы: 1-я группа (п=10) — доноры в возрасте от 30 до 40 лет, 2-я группа (п=10) — доноры в возрасте от 60 до 70 лет. Исследование проводили с использованием клеточной лини hTERT-HDFa (d220). В опытные лунки вносили активированную PRP доноров в концентрации 10%. Пробы без внесения PRP — группа 0(К); в качестве положительного контроля использовали аналогичную среду без PRP с добавлением 10% FBS — группа 0(К 10% FBS). Проводили анализ метаболической активности клеток (МТТ-тест), оценивали миграционную активность фибробластов (scratch assay); определяли интенсивность продукции активных форм кислорода (АФК), выполняли морфологическую оценку клеток и определение механизмов гибели клеток (флуоресцентная микроскопия). Результаты. Внесение обогащенной тромбоцитами плазмы доноров 60—70 лет снижало метаболическую активность культуры hTERT-HDFa в 1-е сутки эксперимента на 85,5% (р<0,001) относительно данных 1-й группы. Интенсивность генерации АФК фибробластами после добавления плазмы доноров 30—40 лет в первые часы была максимальной и в динамике наблюдения проявила тенденцию к снижению. После добавления плазмы доноров 60—70 лет интенсивность генерации АФК не имела существенного прогресса в первые часы, но в динамике достоверно возрастала. По данным микроскопии, наибольший процент жизнеспособных клеток отмечался в группе 0(К 10% FBS) и 1-й группе (доноры 30—40 лет). Наибольший процент некроза и апоптоза зарегистрирован во 2-й группе (доноры 60—70 лет). Заключение. При оценке биологических эффектов PRP доноров разного возраста на культуру фибробластов кожи человека в первые 24 ч выявлено прооксидантное стимулирующее действие плазмы молодых доноров с повышением метаболической активности в отсутствие некроза клеток. Внесение PRP пожилых доноров в 1-е сутки сопровождалось снижением метаболической активности культуры, увеличением процента некроза и апоптоза клеток. Различий по миграционной активности клеток в зависимости от возраста донора плазмы не выявлено.

Авторы:

Издание: Хирургия
Год издания: 2025
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2025.-N 5.-С.36-43. Библ. 14 назв.
Просмотров: 0