Получение и очистка рекомбинантных белков VP2 и VP3 вируса Alongshan группы Jingmenvirus и оценка их иммунохимических свойств

Аннотация:

Вирус Alongshan — представитель неклассифицированной группы Jingmenvirus (Flaviviridae), обнаружен в клещах Ixodes persulcatus, Ixodes ricinus и различных видах комаров в России, Китае, Финляндии и Франции. В отличие от классических ортофлавивирусов, геном вируса Alongshan представлен 4 сегментами РНК положительной полярности. Первый и третий сегменты генома кодируют белки, гомологичные белкам репликативной машинерии ортофлавивирусов, остальные сегменты кодируют предположительно структурные белки, не имеющие известных гомологов: сегмент 2 — VP1a (белок оболочки), VP1b и NuORF; сегмент 4 — VP2 (капсидный) и VP3 (мембранный). Описаны случаи заболевания людей, связанные с вирусом Alongshan. Цель работы — разработка системы экспрессии и очистки рекомбинантных белков VP2 и гидрофильного участка VP3 для проверки их антигенных свойств. Для получения гипериммунных сывороток мышей и рекомбинантных белков в бактериальной системе экспрессии был использован штамм Miass527 вируса Alongshan. Произведены биоинформатический анализ последовательностей, кодирующих целевые белки, генно-инженерное клонирование. Для контроля результатов осуществлены иммуноблотинг и иммуноферментный анализ. В результате рекомбинантные белки вируса Alongshan использованы в лабораторной диагностической тест-системе для определения наличия антител к вирусу. Полученный рекомбинантный белок VP2 способен выявлять антитела во всех исследованных сыворотках инфицированных мышей, а также антитела в сыворотках людей как в вестерн-блоттинге, так и в иммуноферментном анализе. При этом антитела к рекомбинантному участку белка VP3 в противовирусных иммунных сыворотках выявлялись нерегулярно. Заключение. Выявление антител к вирусу Alongshan у пациентов подтверждает необходимость дальнейшего исследования данной группы вирусов.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2025
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2025.-N 2.-С.213-222. Библ. 22 назв.
Просмотров: 0