МЕТОД АНАЛИЗА АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ ПЕПТИДОВ С ПОМОЩЬЮ ЭКСПРЕССИИ КОДИРУЮЩИХ ИХ ГЕНОВ В КЛЕТКАХ Escherichia coli

Аннотация:

Предложена система тестирования новых потенциальных антимикробных пептидов (АМП), основанная на экспрессии кодирующих их рекомбинантных генов в клетках Escherichia coli. Такой подход имеет ряд преимуществ по сравнению с использованием химически синтезированных пептидов, при этом оба подхода эффективно дополняют друг друга. Используемый метод не налагает ограничений на размер АМП, позволяет проводить массовый скрининг мутантных плазмидных библиотек, имеет меньшую стоимость по сравнению с использованием синтетических пептидов. Суть метода заключается в трансформации модельной грамотрицательной бактерии Е. coli плазмидами, несущими в себе рекомбинантный ген, кодирующий АМП, под контролем индуцибельного промотора. После индукции транскрипции бактерии синтезируют АМП, что приводит их к гибели. Детекцию роста бактерий проводят либо путем измерения оптической плотности жидкой культуры, выращиваемой в микропланшете, либо путем капельного высева серийных разведений культуры на агаризованную питательную среду.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2025
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2025.-N 1.-С.25-34. Библ. 24 назв.
Просмотров: 0