ВЫДЕЛЕНИЕ, ОЧИСТКА И СТРУКТУРНОФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕКОМБИНАНТНОГО ТРАНСФЕРРИНА ЧЕЛОВЕКА, ПРОДУЦИРУЕМОГО ШТАММОМ МЕТИЛОТРОФНЫХ ДРОЖЖЕЙ PICHIА PASTORIS

Аннотация:

Получен рекомбинантный модифицированный трансферрин (N413D и N611D), секретируемый штаммом-продуцентом pPIC9pGAPZalpha-short-hTFNG Pickia pastoris (далее — Yst-TFNG2). Предложен многостадийный метод выделения и очистки рекомбинантного трансферрина с выходом целевого продукта 70,29% и чистотой не менее 95%. Структурное соответствие рекомбинантного трансферрина природному аналогу подтверждено методами масс-спектрометрии и кругового дихроизма. Функциональный анализ показал способность полученного белка связывать и высвобождать ионы железа, а также поддерживать пролиферацию эукариотических клеток. Трансферрин (ТФН) человека—это сывороточный гликопротеин, который обеспечивает ряд жизненно важных процессов, связанных с гомеостазом железа в организме. Основная функция ТФН — способность солюбилизировать трёхвалентную форму железа (Fe3+) при физиологическом pH и доставлять внутрь клетки за счёт трансферринопосредованного эндоцитоза (связывание с рецептором ТФН). ТФН необходим для роста большинства клеточных линий, которые активно используются для моделирования патологических процессов in vitro, а также для получения биоинженерных препаратов. В настоящее время биотехнологическая промышленность активно использует бессывороточные среды, при этом необходимые белковые компоненты заменяются их рекомбинантными аналогами с целью снижения риска контаминации инфекционными агентами, которые может содержать сыворотка. Такая технология предполагает получение концентрированных, высокоочищенных рекомбинантных белков, среди которых ТФН является одним из важных незаменимых препаратов.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2025
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2025.-N 5.-С.656-660. Библ. 8 назв.
Просмотров: 0