ПОДБОР ОПТИМАЛЬНЫХ pegRNA ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРАЙМИРОВАННОГО РЕДАКТИРОВАНИЯ АТ-БОГАТЫХ УЧАСТКОВ ГЕНОМА

Аннотация:

Праймированное редактирование (РЕ) представляет собой перспективный подход для лечения наследственных заболеваний, поскольку он обладает повышенной эффективностью и безопасностью в сравнении с традиционными системами CRISPR/Cas9. Данное исследование сосредоточено на разработке этиотропной терапии муковисцидоза путем коррекции варианта F508del методом праймированного редактирования в гене CFTR, так как именно эта делеция является причиной значительной доли случаев заболевания. Хотя РЕ демонстрирует высокую эффективность внесения целевых изменений, метод трудно оптимизировать для АТ-богатых регионов генома,- в одном из которых расположен вариант F508del. Для решения этой проблемы мы систематически оценили 24 направляющие РНК и две различные системы РЕ - РЕmах и PE2-NG. Эффективность коррекции варианта достигала 2,81% без пересчета на эффективность трансфекции в базальных клетках легкого пациентов с гомозиготным вариантом F508del. При этом эффективность трансфекции составила в среднем всего 11,9%, что подчеркивает критическую важность улучшения методов доставки. Наши результаты демонстрируют потенциал праймированного редактирования для лечения муковисцидоза, одновременно указывая на необходимость оптимизации как редактирующих конструкций, так и векторов доставки для достижения клинически значимых уровней коррекции.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2025
Объем: 14с.
Дополнительная информация: 2025.-N 6.-С.833-846. Библ. 40 назв.
Просмотров: 1