Стабильность вакцинных штаммов сезонной живой гриппозной вакцины при их адаптации к культуре клеток MDCK

Аннотация:

Подавляющее большинство гриппозных вакцин в мире производится с использованием развивающихся куриных эмбрионов (РКЭ) в качестве субстрата, однако активно обсуждается вопрос о переводе производства вакцин на перевиваемые клеточные линии, что обеспечит бесперебойность в условиях пандемии птичьего гриппа, а также позволит применять вакцину у лиц с аллергией на куриный белок. При накоплении вакцинных штаммов живой гриппозной вакцины (ЖГВ) в клетках млекопитающих могут возникать адаптационные мутации, влияющие на антигенные и иммуногенные свойства вакцины. Цель работы — изучить биологические свойства вакцинных штаммов ЖГВ подтипов A/H1N1 и A/H3N2, полученных классическим способом в РКЭ, при их адаптации к культуре клеток почки собаки Мадина-Дарби (MDCK). Материалы и методы. В работе были использованы штаммы для аттенуированной ЖГВ А/17/Калифорния/2009/38 (H1N1pdmO9) и А/17/Техас/12/30 (H3N2). Мы провели серийное пассирование этих вирусов на MDCK и проанализировали ростовые свойства изолированных методом бляшек клонов in vitro и in vivo, их иммуногенность, перекрёстную реактивность и защитную эффективность на модели мышей, а также с использованием гипериммунных крысиных сывороток. Экспериментальные серии вакцинных штаммов ЖГВ А/17/Боливия/2013/6585 (H1N1) А/17/Швейцария/2013/1 (H3N2) и В/60/Пхукет/2013/26 были наработаны на культуре MDCK в ГНЦ ВБ «Вектор». Мы провели секвенирование генов поверхностных белков клеточных моновакцин и сравнили мутации, обнаруженные в гемагглютинине и нейраминидазе при адаптации к культуре клеток MDCK в лабораторных и производственных условиях. Результаты. Секвенирование поверхностных антигенов MDCK-адаптированных вариантов вируса A/H1N1 обнаружило адаптационные мутации в молекуле гемагглютинина — N156D (субъединица НА1) и A44V (субъединица НА2) одновременное присутствие которых усиливало репликативные свойства вакцинного штамма ЖГВ Н1 N1 в культуре клеток MDCK. Изучение данного адаптированного к культуре клеток MDCK варианта в эксперименте на мышах не выявило влияния обнаруженных мутаций на иммуногенные и протективные свойства вакцины. Адаптация вакцинного штамма ЖГВ H3N2 к культуре клеток MDCK привела к появлению существенно большего количества замен в молекуле НА, по сравнению с вирусом H1N1. Мутации Y85E и N154K в НА2 являются критическими для размножения вируса в культуре клеток, а набор мутаций Р215Т в НА1 и W92G, D160H в НА2 дали вакцинному штамму существенное преимущество для размножения в культуре клеток MDCK, что может быть эффективно использовано в производстве культуральной ЖГВ Обсуждение. Изучение производственных серий культуральных ЖГВ показало наличие адаптационных мутаций в молекуле гемагглютинина штаммов H1N1 (К116Е в субъединице НА2) и H3N2 (S219Y и N246K в субъединице НА1). Все изученные адаптационные мутации не влияли на антигенность вакцинных штаммов. Заключение. Полученные в ходе исследования данные указывают на перспективность производства культуральной ЖГВ из реассортантных штаммов, подготовленных стандартным путём в РКЭ.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2025
Объем: 14с.
Дополнительная информация: 2025.-N 3.-С.296-309. Библ. 43 назв.
Просмотров: 1