АНАЛИЗ ЗАЩИТНОГО МЕХАНИЗМА СИГНАЛЬНОГО ПУТИ PGC-1a/NRF1/NRF2/TFAM ПРИ ПОРАЖЕНИИ НЕЙРОНОВ КОРЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА, ВЫЗВАННОМ ОКИСЛИТЕЛЬНЫМ СТРЕССОМ

Аннотация:

Для разработки теоретической основы нейрональной антиоксидантной терапии окислительный стресс моделировали в культуре нейронов коры головного мозга in vitro и изучали репаративные механизмы, активированные в повреждённых нейронах через сигнальный путь PGC-PGC-1a/NRF1/NRF2/TFAM транскрипционный фактор А митохондрий (TFAM). Функции белков этого сигнального пути изучали с помощью программы STRING, анализирующей сетевые белок-белковые взаимодействия. Анализ ключевых генов сигнального пути PGC-1a/NRF1/NRF2/TFAM проводили с помощью программы Cytoscape. Нейроны in vitro инкубировали с Н2О2 в концентрациях 25, 50, 75 и 100 мМ, после чего их жизнеспособность оценивали методом ССК8. В дальнейших экспериментах нейроны инкубировали с Н2О2 в концентрации 75 мкМ, оказывающей максимальный повреждающий эффект, в течение 24, 48 или 72 ч. С помощью вестерн-блоттинга анализировали влияние окислительного стресса на экспрессию PGC-1a, NRF1, NRF2, ATP-5a и TFAM в нейронах. Уровень АФК в клетках, величину митохондриального мембранного потенциала, проницаемость митохондриальных пор и апоптоз нейронов оценивали методом проточной цитометрии. Анализ сети белок-белковых взаимодействий показал, что коактиватор транскрипции PGC-1a является ключевым регулятором энергетического метаболизма корковых нейронов, а NRF1 и NRF2 играют важную роль в биогенезе митохондрий и в ответе клеток на окислительный стресс. TFAM необходим для базальной транскрипции митохондриальной ДНК, причём его ген является концентратором сигнального пути PGC-1a/NRF1/NRF2. Вестерн-блоттинг и проточная цитометрия показали, что с развитием повреждений, вызванных окислительным стрессом, PGC-1a активировал экспрессию белков NRF1, NRF2 и TFAM, одновременно противодействуя снижению митохондриального мембранного потенциала и открыванию митохондриальных пор. При этом факторы NRF1 и NRF2 снижали уровень АФК и интенсивность апоптоза, а TFAM увеличивал экспрессию АТР-5а. Таким образом, при окислительном стрессе PGC-1a вызывает антиокислительные и противоапотозные эффекты у повреждённых корковых нейронов путём активации сигнального пути NRF1/NRF2/TFAM.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2025
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2025.-N 8.-С.240-248. Библ. 24 назв.
Просмотров: 1