С-КОНЦЕВОЙ ДОМЕН ГЕМОЛИЗИНА II Bacillus cereus СПОСОБЕН ОБРАЗОВЫВАТЬ ГОМО- И ГЕТЕРООЛИГОМЕРНЫЕ ФОРМЫ ТОКСИНА HA ПОВЕРХНОСТИ МЕМБРАНЫ

Аннотация:

Гемолизин II (НIуII)-один из ключевых патогенных факторов условно-патогенной грамположительной бактерии Bacillus cereus. HlyII, образуя поры на мембранах, лизирует клетки-мишени. HlyII относят к группе бета-пороформирующих токсинов. Отличительная особенность HlyII - наличие С-концевого домена из 94 a.o. (HlyIICTD). Показано, что в слабокислых условиях (pH 5.0), соответствующих примембранной области, С-концевые домены (как сами по себе, так и в составе токсина) образуют устойчивые комплексы, состоящие из полноразмерных и укороченных молекул токсина. HlyII, HlylILCTD (большой С-концевой фрагмент Met225-Ile412) и HlyIICTD получали с использованием рекомбинантных штаммов-продуцентов Escherichia coli BL21(DE3). Биотинилирование HlyIICTD проводили с использованием М-гидроксисукцинимидного эфира биотина. Взаимодействие HlyIICTD с HlyiICTD, HlyIILCTD и HlylI, а также взаимодействие HlyIICTD с мембранами эритроцитов исследовали иммуноферментным анализом и иммуноблоттингом, как с использованием стрептавидина, конъюгированного с пероксидазой хрена, так и с использованием моноклональных антител против HlyIL HlyIICTD в слабокислых условиях взаимодействовал как с доменом HlylICTD в составе полноразмерного токсина, так и с белком HlyIICTD. Взаимодействие HlyIlCTD с мембраной эритроцитов кратно увеличивалось в присутствии токсина.

Авторы:

Издание: Биоорганическая химия
Год издания: 2025
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2025.-N 4.-С.627-635. Библ. 32 назв.
Просмотров: 0