МЕТОДИКА ДЛЯ СТАБИЛЬНОГО ВЫДЕЛЕНИЯ ДВУЦЕПОЧЕЧНОЙ PHК ИЗ ШТАММА Escherichia coli HT115 БЕЗ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ФЕНОЛА

Аннотация:

Получение фракции двуцепочечной PHК - неотъемлемая часть исследований РНК-интерференции, направленных на решение как фундаментальных, так и прикладных задач. Наработка дцРНК в культуре бактерий - распространенная методика в силу сравнительно невысокой стоимости и потенциала для масштабирования. B данной статье мы предлагаем новый метод для быстрого и эффективного выделения дцРНК из культуры бактерий в качестве альтернативы классической фенол-хлороформной экстракции. B разработанной нами методике фенол заменен на менее токсичный метанол, а выделенная таким образом бактериальная тотальная PHК содержит до 25% целевой молекулы, при этом примесь ДНК в ней отсутствует, что в том числе делает допустимым применение такой дцРНК без дополнительных этапов очистки. Применение разработанной методики будет оправдано в лабораториях, занимающихся как фундаментальными, так и прикладными исследованиями РНК-интерференции. Однако для масштабирования технологии для применения в сельском хозяйстве могут потребоваться корректировки описанного в данной работе протокола.

Авторы:

Издание: Биоорганическая химия
Год издания: 2025
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2025.-N 4.-С.715-723. Библ. 20 назв.
Просмотров: 0