Получение и характеризация in vitro рекомбинантного домена RCL серпина Ipis клещей Ixodes persulcatus

Аннотация:

Иксодовые клещи являются переносчиками множества инфекционных патогенов человека и животных. В процессе укуса клещ выделяет специфические белки, вырабатываемые в его слюнных железах. Эти белки играют ключевую роль в различных биологических процессах, включая модуляцию иммунного ответа хозяина, передачу патогенов, переработку крови, размножение и развитие клеща. Среди этих белков особое внимание уделяется серпинам, которые рассматриваются как перспективные кандидаты для разработки вакцин и методов борьбы с инфекционными заболеваниями, передаваемыми клещами. Цель исследования. Получение и характеризация in vitro рекомбинантного домена RCL серпина Ipis клещей Ixodes persulcatus. ПЦР-продукт клонировали в плазмиды PCR 2.1 и рЕТ-200 D/TOPO. Трансформацию производили на химически компетентных клетках Е. coli One Shot ТОРЮ и Е. coli BL2KDE3). Очистку белка от примесей никельхелатной хроматографией с помощью смолы Ni-NTA-Superflow. Для анализа иммуногенности полученного белка иммунизировали мышей линии BALB/c. Полученные сыворотки лабораторных животных были протестированы методом иммуноферментного анализа. Построение структур клещевых серпинов проводили методом моделирования по гомологии с использованием сервера AlphaFold (https://www.alphafold.com/). В результате в рамках данного исследования получен и охарактеризован рекомбинантный домен RCL серпина lpis-клещей Ixodes persulcatus. Проведена оценка иммуногенности рекомбинантного белка путем иммунизации лабораторных животных и оценка специфической активности полученных сывороток методом ИФА и иммуноблота. Построены 3D-модели клещевых серпинов. Заключение. Таким образом, в данном исследовании был получен и охарактеризован рекомбинантный домен RCL серпина Ipis клещей Ixodes persulcatus. После проведения дополнительных исследований полученный рекомбинантный домен RCL серпина Ipis планируется использовать в качестве моно- и мультиантигенных белковых вакцин.

Авторы:

Издание: Молекулярная генетика ,микробиология и вирусология
Год издания: 2025
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2025.-N 3.-С.25-30. Библ. 27 назв.
Просмотров: 1