Влияние инактивации гена гибридной гистидинкиназы на морфологию клеток у бактерий Azospirillum baldaniorum и Azospirillum brasilense

Аннотация:

Цель работы — проверка гипотезы о влиянии расположенного на хромосоме гена HSHK-RR, кодирующего гибридную мультисенсорную гистидинкиназу, на морфологию бактерий рода Azospirillum. В работе использовали штаммы A. baldaniorum Sp245, Laf мутант Sp245.1062 (Sp245-HSHKDRR-Km), A. brasilense Sp7 и Sp7.10030 (Sp7-HSHKDRR-Km). Морфология бактерий и их подвижность охарактеризованы с применением электронной микроскопии. Относительный уровень транскрипции генов определяли методом ПЦР в реальном времени. В результате гены гибридной мультисенсорной гистидинкиназы (HSHK-RR) у штаммов Sp245 (AZOBR 1 50176) и Sp7 (АМК58_10030) на 95% гомологичны. Для получения мутанта штамма Sp7 мы произвели замену гена АМК58_10030 на конструкцию HSHKDRR-Km, созданную на основе AZOBR 1501 76. Замена внутреннего фрагмента гена HSHK-RR на ген устойчивости к канамицину приводила у мутантов Sp245-HSНKDRR-Km и Sp7-HSHKDRR-Km к изменению морфологии и подвижности клеток в полужидком агаре. Клетки мутантов были короче клеток родительских штаммов Sp245 и Sp7 и двигались медленнее в полужидком агаре, образуя колонии значительно меньшего диаметра. Оба мутанта сохраняли синтез функционирующего полярного жгутика (Fla). Однако в случае Sp7-HSHKDRR-Km до 45% клеток синтезировали на агаризованных средах редкие или единичные латеральные жгутики (Laf), тогда как у Sp245-НSHKDRR-Km таких бактерий было не более 15%. Заключение. Установлено, что биогенез Laf находится под многоступенчатым контролем, включающим двухкомпонентную систему передачи сигналов с участием HSHK-RR, кодируемой хромосомными генами, у Sp245 и Sp7, соответственно, штаммам AZOBR_150176 и АМК5810030. Анализ фенотипов мутантов по генам AZOBR 1 50176 и АМК58_10030 показал, что исследуемая HSHK-RR модулирует подвижность Sp245 и Sp7 в условиях механического стресса, участвуя в контроле транскрипции генов флагеллина Iaf1 и компонентов экспортной системы сборки латеральных жгутиков.

Авторы:

Издание: Молекулярная генетика ,микробиология и вирусология
Год издания: 2025
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2025.-N 3.-С.47-54. Библ. 25 назв.
Просмотров: 1