Скрининг на мутации TERTp методом цифровой капельной ПЦР коллекции из 52 парных образцов ДНК из плазмы крови и опухолевых тканей пациентов с глиобластомой

Аннотация:

Цель исследования. Проверка возможности создания неинвазивной системы для дифференциальной диагностики и молекулярно-генетической характеризации опухолевых поражений ЦHC на основе определения мутаций C228T и C250T промотора каталитической субъединицы теломеразы (TERTp) на примере глиобластомы. Материал и методы. Получена коллекция свежезамороженных опухолевых образцов плазмы крови и тканей (в парном соответствии) 52 пациентов, проходивших лечение в HMИЦ нейрохирургии им. акад. H.H. Бурденко в 2022—2023 гг. Использовался метод цифровой капельной полимеразной цепной реакции (цк?ЦP) с применением флуоресцентно-меченных TaqMan-зондов для абсолютного количественного определения мутаций C228T и C250T TERTp в образцах ДНК, выделенной из коллекции коммерческими наборами. Анализ данных цк?ЦP проводили с базовой линией в зависимости от уровня сигнала контрольной реакции без добавления матрицы ДНК. Результаты. При анализе выборки из 52 парных образцов (плазма — ткань) ДНК пациентов показано наличие мутаций C228T и C250T в опухолевых образцах: C228T была обнаружена в 33 (63,5%) случаях, а C250T — в 14 (26,9%) случаях. B образцах внеклеточной ДНК (вкДНК) было обнаружено 5 образцов с мутацией C228T и 3 образца с мутацией C250T. Мутация C228T была обнаружена в 15,1% случаев, а мутация C250T — в 21,4% случаев. Заключение. Мутации TERTp, характерные для опухолевой ДНК глиобластом, определяются методом цифровой капельной полимеразной цепной реакции как в образие опухоли, так и во внеклеточной ДНК плазмы крови, что свидетельствует о переходе опухолевой ДНК в циркулирующую опухолевую (цoДНК) и о том, что цoДНК проходит через гематоэнцефалический барьер пациентов. Апробирована возможность неинвазивной молекулярно-генетической характеризации опухолевых поражений ЦHC в плазме крови пациентов с глиобластомой. Анализ полученных результатов говорит о необходимости оптимизации выделения внеклеточной ДНК и модификации системы тестирования для повышения эффективности метода.

Авторы:

Издание: Журнал вопросы нейрохирургии им.Н.Н.Бурденко
Год издания: 2025
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2025.-N 5.-С.87-95. Библ. 17 назв.
Просмотров: 1