ОПТИМИЗАЦИЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ЭКСТРАКТА ИЗ ЛИСТЬЕВ REYNOUTRIA SACHALINENSIS ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ШИКИМАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ

Аннотация:

Введение. Reynoutria Sachalinensis (рейнутрия сахалинская) является перспективным объектом исследования механизмов синтеза таннинов в растениях из-за содержания большого количества проантоцианидинов. Цель работы - оптимизация методов приготовления экстрактов из листьев R. Sachalinensis для определения активности шикиматдегидрогеназы, ключевого фермента шикиматного пути, связанного с биосинтезом таннинов. Материал и методы. Экстракцию с осаждением белка проводили при помощи 60 или 80% (v/v) ацетона, а также с применением глицерола и без него. Оценивали влияние замораживания экстрактов при -80 0C на активность шикиматдегидрогеназы. Результаты. Выявлено, что замораживание как неочищенных, так и очищенных ацетоном экстрактов не снижает активность шикиматдегидрогеназы, а увеличение концентрации ацетона до 80% (v/v) приводит к повышению активности фермента по сравнению с концентрацией ацетона 60%. Установлено, что глицерол не оказывает значимого влияния на активность фермента. Выводы. Оптимизированный метод экстракции с использованием 80% (v/v) ацетона и низкотемпературного хранения позволяет эффективно проводить экстракцию белков и ферментов, в частности шикиматдегидрогеназы, из листьев R. Sachalinensis для дальнейших биохимических исследований. Ключевые слова: шикиматдегидрогеназа, экстракция, Reynoutria sachalinensis, ацетон, таннины.

Авторы:

Издание: Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии
Год издания: 2025
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2025.-N 10.-С.50-56. Библ. 30 назв.
Просмотров: 3