Противоопухолевый эффект камптотецина в отношении клеток глиобластомы человека посредством подавления экспрессии BRIP1

Аннотация:

Введение. Глиобластома-наиболее агрессивная и распространенная злокачественная опухоль головного мозга, отличающаяся высокой гетерогенностью, способностью к инфильтрации и частыми рецидивами. BRCA1-взаимодействующий белок С-терминальной геликазы 1 (BRIP1) участвует в системе репарации ДНК и, согласно ряду исследований, может играть существенную роль в онкогенезе. Камптотецин, ингибитор топоизомеразы I, обладает цитотоксическим действием в отношении многих опухолевых клеток, однако его влияние на экспрессию BRIPl при глиобластоме до настоящего времени изучено недостаточно. Цель - определить значение гена BRIPl в прогрессии глиобластомы и оценить противоопухолевый эффект камптотецина in vitro, связанный с ингибированием BRIPl. Материалы и методы. Из базы данных GEO (сеты GSE54004 и GSE43378) были отобраны дифференциально экспрессируемые гены между первичными образцами тканей глиом низкой и высокой степени злокачественности. Проводился функциональный анализ с использованием базы данных «Онтология генов» и Киотской энциклопедии генов и генома, а также осуществлялось построение сети белок-белкового взаимодействия и выявление ключевых генов с помощью плагина CytoHubba в Cytoscape. Анализ CMap использовался для идентификации соединений, способных подавлять сверхэкспрессированные при глиобластоме гены, в том числе BRIP1. Клеточные линии глиобластомы U251, U87 и LN229 и нормальные астроциты человека были использованы в экспериментальном исследовании. Уровень экспрессии белка BRIPl оценивали методом вестерн-блот-анализа. Противоопухолевый эффект камптотецина изучали с помощью теста MTT и проточной цитометрии. Данное исследование одобрено независимым этическим комитетом и утверждено решением ученого совета ФГАОУ BO РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России. Результаты. Среди 200 найденных дифференциально экспрессируемых генов, значимо сверхэкспрессированных в глиомах высокой степени злокачественности, BRIPl продемонстрировал высокие показатели степени взаимодействий в сети белок-белкового взаимодействия и был ассоциирован с путями репарации ДНК, гомологичной рекомбинацией и клеточным циклом (результаты GSEA). Поиск по базе CMap указал на камптотецин как одно из перспективных низкомолекулярных соединений для подавления BRIP1 (обогащение -0,949 и p = 0,00026). Уровень экспрессии белка BRIPl был повышен в клеточных линиях U251, U87 и LN229 по сравнению с нормальными астроцитами человека, что подтверждает данные вестерн-блот-анализа. Введение камптотецина в культуру U251 в дозозависимой манере снижало жизнеспособность и пролиферацию опухолевых клеток, ингибировало их миграцию, а также индуцировало апоптоз. При этом наблюдалось дозозависимое снижение уровня экспрессии белка BRIP1. Заключение. Проведенное исследование указывает на ключевую роль BRIP1 в развитии глиобластомы и демонстрирует, что камптотецин способен ингибировать развитие и прогрессирование глиобластомы полностью или частично за счет подавления активности BRIP1. Полученные данные позволяют рассматривать BRIP1 как потенциальную терапевтическую мишень и подтверждают целесообразность дальнейшей разработки камптотецина и его аналогов для таргетной терапии глиобластомы.

Авторы:

Издание: Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии
Год издания: 2025
Объем: 17с.
Дополнительная информация: 2025.-N 3.-С.70-86. Библ. 28 назв.
Просмотров: 1