Генетическое разнообразие мутаций, влияющих на гемолитическую активность бактерий Bordetella pertussis при культивировании in vitro

Аннотация:

Введение. Ключевую роль в патогенезе коклюша, антропонозного инфекционного заболевания, играет двухкомпонентная система BvgAS1 регулирующая транскрипцию генов вирулентности возбудителя. Факторы, оказывающие воздействие на работу системы BvgAS бактерий Bordetella pertussis в организме человека, практически не изучены. Известно, что нарушение структуры оперона bvgAS приводит к фазовым переходам и изменению вирулентности. Перемещение IS-элементов в оперон bvgAS и другие гены вирулентности возбудителя коклюша является важным механизмом в регуляции их экспрессии, потенциально приводящим к длительной персистенции бактерий в организме человека. Цель работы — поиск и характеристика спонтанных инсерционных мутантов бактерий В. pertussis по генам вирулентности bvgAS, cya и fhaB, ответственным за гемолитическую активность при культивировании бактерий in vitro. Материалы и методы. Использованы штаммы В. pertussis из коллекции НИЦЭМ им. H.Ф. Гамалеи: вирулентный штамм В. pertussis475 и изогенный ему аттенуированный штамм В. pertussis4MKS, вирулентность ,-штамм В. pertussis Tohama I и его авирулентный мутант В. pertussis 347. Бактерии культивировали на казеиново-угольном агаре с добавлением крови. Формирование зон гемолиза оценивали визуально. Для молекулярно-генетической характеристики полученных инсерционных мутантов использовали методы ПЦР ПЦР-РВ, секвенирования. Результаты. In vitro выделены мутанты В. pertussis с нарушенной гемолитической активностью (фенотиг Hly-) с инсерциями IS-элементов в генах fhaB и bvgAS, а также мутанты, сохранившие гемолитическую активность (фенотип Hly+), содержащие IS-элементы в ранее не описанной ориентации в гене bvgAS. Частота образования инсерционных мутантов зависела от условий культивирования и генотипа бактерий. Заключение. Приведены аргументы, свидетельствующие о возможной роли IS-элементов в переходе бактерий В. pertussis в состояние пониженной вирулентности, что обеспечивает длительную персистенцию возбудителя коклюша в организме человека.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2025
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 2025.-N 5.-С.592-603. Библ. 24 назв.
Просмотров: 0