Способность адгезивно-инвазивной Escherichia coii от пациента с болезнью Крона колонизировать и вызывать воспаление в кишечнике мышей

Аннотация:

В настоящее время активно изучается роль кишечной микробиоты в возникновении и/или поддержании воспаления кишечника при воспалительных заболеваниях кишечника (ВЗК), в частности у пациентов с болезнью Крона (БК). Цель работы - подбор оптимальных условий для моделирования воспаления кишечника, вызванного изолятом Escherichia coli, полученным от пациента с БК, и обладающего адгезивно-инвазивным фенотипом (АИЕС) в эксперименте in vivo. Исследование проведено с использованием 3 групп по 6 мышей-самцов C57Black/6 в каждой: 1-я группа - контроль-вода, 2-я -контроль-пропионат, 3-я - ВL2K2-пропионат. После 8 дней карантина мыши 2- й и 3-й групп вместо воды получали 20 мМ раствор пропионата натрия. На 4-й день, за 24 ч до введения штамма всем мышам внутрижелудочно вводили 20 мг стрептомицина в 100 мкл фосфатного буфера. На следующий день мышам 3- й группы внутрижелудочно был введен изолят АИЕС BL2K2, полученный от пациента с БК (БК-изолят), в 100 мкл фосфатного буфера, а контрольным мышам (1-я и 2-я группы) - фосфатный буфер. Через 21, 28 и 35 сут после введения штамма проведен сбор материала: кровь и 3 отдела кишечника (тонкая, слепая и толстая кишка). Из отделов кишечника были получены лизаты, часть из них была использована для посевов на селективную среду для Е. coli, получения отдельных колоний с их последующим полногеномным секвенированием для доказательства колонизации BL2K2 разных отделов кишечника. Другая часть использована для определения содержания цитокинов методом иммунофер-ментного анализа и для протеомного анализа. В результате показано, что БК-изолят успешно колонизировал, кишечник мышей в условиях эксперимента. Колонизация, сохраняющаяся в течение 35 дней, приводила к заметным изменениям в тканях толстой, тонкой и слепой кишки. Обнаружен повышенный уровень цитокинов фактора некроза опухоли а. и интерлейкина 6 в лизатах толстой кишки. Сравнительный протеомный анализ ткани толстой кишки показал, что колонизация БК-изолята вызывает активацию процессов, связанных с ответом на бактериальную инфекцию (вырос уровень иммуноглобулинов, активаторов Т-клеточного ответа, рецептора бактериального компонента пилей I типа FimH, секретируемых лектинов, TLR-опосредованных регуляторов, белков, обладающих бактерицидными свойствами), а также активацию процессов, связанных с накоплением внеклеточного матрикса, приводящего к фиброзу, что является одним из признаков воспалительного процесса (повысился уровень коллагенов, регуляторов сборки коллагеновых фибрилл, интегринов и при этом снизился уровень белков, участвующих в деградации внеклеточного матрикса). Колонизация БК-изолята приводила к изменению липидного обмена и снижению энергетического метаболизма в клетках ткани толстой кишки. Заключение. Разработана модельная система для более глубокого изучения участия АИЕС в инициировании и поддержании воспаления кишечника, что позволит подробнее изучить роль АИЕС в данном процессе.

Авторы:

Издание: Вопросы питания
Год издания: 2025
Объем: 19с.
Дополнительная информация: 2025.-N 5.-С.42-60. Библ. 46 назв.
Просмотров: 1