ПОПЫТКА ПОВЫШЕНИЯ ТЕРМОСТАБИЛЬНОСТИ МУТАНТНОГО ФОТОСИНТЕТИЧЕСКОГО РЕАКЦИОННОГО ЦЕНТРА Cereibacter sphaeroides С ПОМОЩЬЮ ДИСУЛЬФИДНЫХ СВЯЗЕЙ

Аннотация:

Методы сайт-направленного мутагенеза успешно используются в структурно-функциональных исследованиях фотосинтетических реакционных центров (РЦ) пурпурных бактерий. Замечено, что многие аминокислотные замены вблизи кофакторов переноса электрона снижают устойчивость РЦ Cereibacter sphaeroides к температуре и влияют на количество РЦ в мембранах. Ранее нами сообщалось [Selikhanov et al. (2023) Membranes, 25, 154], что внесение межсубъединичных дисульфидных мостиков на периплазматической или цитоплазматической поверхности комплекса способствует увеличению термостабильности РЦ С. sphaeroides. В данной работе предпринята попытка повышения термостабильности мутантного РЦ с замещением Не М206 на Gin с помощью внесения межсубъединичных дисульфидных связей. Этот РЦ представляет значительный интерес для изучения механизмов ранних процессов переноса электронов в РЦ. Был проведен анализ влияния мутаций на количество РЦ в хроматофорах, и обнаружено, что мутация I(M206)Q приводит к двойному уменьшению содержания РЦ в хроматофорах, внесение дисульфидных связей на цитоплазматической или периплазматической сторонах комплекса снижает количество РЦ в мембранах на треть, тройное замещение I(M206)Q/G(M19)C/ T(L214)C - почти в 4 раза, а замещения I(M206)Q/V(M84)C/G(L278)C приводят к нарушению сборки РЦ в мембране. Показано, что внесение межсубъединичной S-S-связи на цитоплазматической поверхности комплекса не оказало существенного влияния на термостабильность РЦ I(M206)Q. Обсуждаются собственные и литературные данные в отношении факторов, влияющих на процессы сборки и обеспечивающих стабильность структуры интегральных мембранных комплексов.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2025
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2025.-N 7.-С.951-960. Библ. 34 назв.
Просмотров: 3