ВЛИЯНИЕ ЦИТОСКЕЛЕТА НА АКТИВНОСТЬ И СВОЙСТВА АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ ЭРИТРОЦИТОВ КРЫС

Аннотация:

Ацетилхолинэстераза - ключевой фермент холинергической системы, который катализирует гидролиз ацетилхолина до холина и ацетата. Фермент обнаруживается в тканях мозга и эритроцитах млекопитающих. Изучение его активности в мембранных препаратах эритроцитов актуально для диагностики влияния фосфорорганических соединений и при создании методов коррекции нейродегенеративных заболеваний. Цитоскелет эритроцитов, основанный на комплексе спектрина и актина, играет важную роль в поддержании механических свойств клетки. Влияние компонентов цитоскелета на ферментативную активность ацетилхолинэстеразы позволяет глубже понять регуляцию этого фермента. Цель исследования - изучение влияния цитоскелета на активность и кинетические параметры ацетилхолинэстеразы эритроцитов крыс. В эксперименте использовали крыс Wistar массой 200-230 г, содержавшихся на стандартной диете. Из полученных эритроцитов после гипоосмотического гемолиза готовили тени (мембранные препараты) и бесспектриновые везикулы, удаляя часть цитоскелетных белков. Активность ацетилхолинэстеразы определяли по методу Elman et. al., (1961) в пересчете на микромоли гидролизованного ацетилтиохолина. Оценку кинетических параметров (Кm и Vmax) проводили по методу Лайнувивера-Берка. В результате активность фермента в бесспектриновых везикулах снижалась примерно на 30%, однако последующая обработка детергентом Тритон Х-100 приводила к восстановлению активности до уровней, сопоставимых с тенями эритроцитов. Анализ показал, что отсутствие цитоскелета не вносило изменений в значения Кm и Vmax, что подтверждает стабильность каталитических свойств фермента. Уменьшение белкового состава в везикулах подтверждено методом Лоури. Выводы. Функциональная активность ацетилхолинэстеразы сохраняется при частичном удалении цитоскелета. Обработка детергентом выявляет латентную часть активности фермента, что связано с нарушением ориентации мембраны при везикуляции. Полученные результаты расширяют возможности использования мембранных препаратов эритроцитов в моделировании работы холинэстераз при различных физиологических и патологических состояниях.

Авторы:

Издание: Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии
Год издания: 2025
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2025.-N 11.-С.101-106. Библ. 18 назв.
Просмотров: 1