АНАЛИЗ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ В ЛЕГКИХ КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ХРОНИЧЕСКОЙ ТРОМБОЭМБОЛИЧЕСКОЙ ЛЕГОЧНОЙ ГИПЕРТЕНЗИЕЙ

Аннотация:

Хроническая тромбоэмболическая легочная гипертензия (ХТЭЛГ) остается тяжелым заболеванием с низкими показателями выживаемости у неоперабельных пациентов, несмотря на успехи в лечении. Молекулярные механизмы, лежащие в основе патогенеза ХТЭЛГ, не полностью изучены, что требует дальнейших исследований для выявления новых терапевтических мишеней. Несмотря на то, что разработано множество моделей ХТЭЛГ на животных, для установления их клинической значимости требуется демонстрация молекулярной биоэквивалентности с патофизиологическими процессами человека, в частности посредством соответствия профилей экспрессии генов. Цель работы - проанализировать дифференциальную экспрессию генов в тканях легких крыс при моделировании ХТЭЛГ введением альгинатных микросфер и оценить возможность применения данной модели для изучения новых терапевтических подходов при ХТЭЛГ. ХТЭЛГ была смоделирована у крыс линии Wistar с помощью повторных внутривенных инъекций биодеградируемых альгинатных микросфер. Транскрипционный профиль в образцах легочной ткани, взятых у крыс с ХТЭЛГ на 2-й и 6-й неделях, а также крыс контрольной группы, был проанализирован с помощью технологии высокопроцессивного секвенирования РНК. Дифференциально экспрессируемые гены (ДЭГ) были идентифицированы с использованием DESeq2. Валидацию изменения экспрессии генов проводили методом ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Транскриптомный анализ выявил, что при моделировании ХТЭЛГ на 2-й неделе повышалась экспрессия генов, связанных с воспалением, тогда как на 6-й неделе наблюдалось снижение экспрессии генов, ассоциированных с внеклеточным матриксом. Анализ факторов транскрипции выявил преимущественное регулирование промоторов ДЭГ белками семейства цинковых пальцев С2Н2: Zfp278 и Klf5, что предполагает их участие в клеточном ответе при формировании ХТЭЛГ. Анализ экспрессии генов Cavl, Eng, vWF, Gja5 методом ОТ-ПЦР на большей выборке образцов ткани легких подтвердил динамику изменения экспрессии, выявленную при анализе транскриптома. Проведенное исследование выявило динамические транскрипционные изменения при формировании ХТЭЛГ у крыс, включая дисрегуляцию генов внеклеточного матрикса, воспаления и эндотелиальной дисфункции, что соответствует современным представлениям патогенеза ХТЭЛГ. Полученные данные демонстрируют сопоставимость разработанной животной модели на крысах с течением ХТЭЛГ у людей на уровне изменения транскрипционного профиля.

Авторы:

Издание: Российский физиологический журнал
Год издания: 2025
Объем: 17с.
Дополнительная информация: 2025.-N 11.-С.1750-1766. Библ. 61 назв.
Просмотров: 1