Сборка стрессорных гранул персонифицированными эндотелиальными клетками HUVEC

Аннотация:

Стрессорные гранулы (СГ) - внутриклеточные безмембранные органеллы, формируемые клеткой в ответ на неблагоприятные, нефизиологические воздействия. Они представляют собой временные рибонуклеопротеиновые частицы, включающие в свой состав нетранслируемые мРНК и тем самым способствующие сохранению этих мРНК на время клеточного стрессового ответа. Кроме функции депонирования, СГ могут быть важными интеграторами информации в клетке в стрессовых условиях и влиять на «клеточную судьбу». Большинство современных исследований СГ проводится с использованием иммортализованных клеточных линий и специфических индукторов, действию которых клетки в in vivo условиях при развитии патологического процесса обычно не подвергаются. Цель работы. Работа направлена на оценку способности персонифицированных эндотелиальных клеток HUVEC собирать стрессорные гранулы при действии некоторых индукторов клеточного стресса, близких к действующим in vivo патологическим факторам. Эндотелиальные клетки HUVEC выделяли из пупочных вен здоровых рожениц. В работе впервые были использованы персонифицированные культуры эндотелия, пулирование клеток от разных доноров не проводилось. К HUVEC применяли типичные условия сборки СГ, установленные другими исследовательскими группами для клеточных линий: окислительный и восстановительный стрессы. Также исследовались стрессоры, значимые для ассоциированных с дисфункцией эндотелия патологий: солевая нагрузка, вращательно-ос-циллирующий поток жидкости, а также холодовой шок. Для детектирования СГ использовалось иммунофлуо-ресцентное детектирование маркера СГ белка G3BP1, конфокальная микроскопия и микроскопия сверхвысокого разрешения STED. В результате показана сборка G3BP1-содержащих СГ клетками HUVEC в ответ на острый окислительный (0,5 мМ NaAsO2,30 минут) и острый восстановительный стресс (3 мМ DTT, 1,5 часа), что подтверждает возможность детектирования СГ в персонифицированных куль турах HUVEC. Впервые была продемонстрирована способность эндотелия собирать СГ в ответ на повышенную концентрацию хлорида натрия и 200 мМ маннит. Не было обнаружено стрессорных гранул при десятичасовом холодовом шоке в клетках ЭК, хотя ранее СГ были детектированы в других клеточных типах другими авторами в сходных условиях. Не было обнаружено также G3BP1 -содержащих СГ при воздействии осциллирующего потока жидкости на HUVEC. Полученные результаты могут указывать на тканевую специфику клеточных стрессовых ответов в эндотелиальных клетках.

Авторы:

Издание: Патологическая физиология и экспериментальная терапия
Год издания: 2025
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2025.-N 4.-С.36-46. Библ. 36 назв.
Просмотров: 0