Антифибротическое действие плацентарных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток при фиброзе печени

Аннотация:

К развитию фиброза печени приводит большое количество хронических заболеваний печени, таких как хронические вирусные гепатиты, алкогольная интоксикация, первичный склерозирующий холангит, аутоиммунные гепатиты и другие. В патогенезе развития фиброза печени на фоне действия этиологического фактора ведущее значение отводится активации перисинусоидальных клеток печени Ито с последующей их дифференцировкой в миофибробластоподобные клетки, которые являются центральными регуляторами фиброгенеза. В настоящем исследовании проводится аллогенная трансплантация мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК), выделенных из плаценты животным с фиброзом печени. Эти клетки способны к синтезу ряда факторов, которые потенциально можно рассматривать как антифиброгенные. Цель исследования - оценка возможности использования плацентарных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для лечения фиброза печени. Эксперименты выполнены на 30 мышах-самцах в возрасте 8-10 недель. Фиброз моделировали путем внутрибрюшинного введения тетрахлорметана в количестве 2 мкл/г веса животного в течение 6 недель, 2 раза в неделю. Далее животные, у которых был индуцирован фиброз печени, были разделены на две группы: основную группу и группу положительного контроля. Основная группа - мыши, которым однократно внутривенно вводили ММСК в количестве 1x106 клеток/мышь в 0,2 мл. Положительный контроль составили мыши, которым после моделирования фиброза не вводили клетки. Через 5 недель после моделирования фиброза печени производилась оценка эффективности проводимой терапии. Выделение культуры плацентарных ММСК осуществлялось из хориона плаценты согласно методу А С. Тепляшина и соавт. 2004. Жизнеспособность выделенных клеток оценивали с помощью 7-AAD. Для оценки тяжести фиброза использовалась шкала METAVIR. Количественный анализ содержания коллагена в печени проводили с использованием набора Piero Sirius Red Stain Kit. В гистологическом препарате печени проводилось определение количества ММР9, ММР13, TIMP1, a-SMA-положительных клеток, CD45 положительных клеток. В гомогенате печени оценивалось содержание факторов роста HGF и TGF-p, Pro-Collagen I alpha 1 p. В сыворотке крови определялись уровни провоспалительных цитокинов: интерлейкина-1 р, фактора некроза опухоли-а.Полученные данные были проанализированы с использованием методов вариационной статистики. Для сравнения параметров между группами применяли: t-критерий Стьюдента - при нормальном распределении данных (проверялось тестом Шапиро - Уилка), непараметрический U-критерий Манна - Уитни - при отклонении от нормального распределения. Для оценки взаимосвязи множественных переменных использовали однофакторный дисперсионный анализ (ANOVA) с пост-хок тестом Тьюки для множественных сравнений. В результате через 5 недель после моделирования фиброза печени на фоне трансплантации ММСК отмечено снижение активности фиброза по шкале METAVIR на 50%. Трансплантация ММСК сопровождалась уменьшением содержания CD 45+ клеток в печени, что приводило к снижению уровня провоспалительных цитокинов в сыворотке крови. Введение ММСК также сопровождалось уменьшением площади соединительной ткани на 33,1%. Площадь гистологического препарата, окрашенного на a-SMA, а также количество a-SMA- положительных клеток после введения ММСК сократились на 28,3% и на 31,0% соответственно. Введение ММСК привело к снижению количества ММР9 - и увеличению ММР13 - продуцирующих клеток, а также к уменьшению количества TIMP-1 - положительных клеток. Выявлено снижение уровня TGF-p и увеличениеНСЕ в печени. При анализе биохимических показателей сыворотки получено, что введение ММСК привело к снижению активности трансаминаз, восстановлению белковосинтетической функции печени и снижению уровня общего билирубина. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о высоком терапевтическом потенциале плацентарных ММСК. Использование ММСК, выделенных из хориона плаценты, можно рассматривать как перспективный неоперативный способ лечения фиброза печени.

Авторы:

Издание: Патологическая физиология и экспериментальная терапия
Год издания: 2025
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 2025.-N 4.-С.89-100. Библ. 21 назв.
Просмотров: 2