Экспрессия генов цитокинов во фракциях клеток костного мозга, изолированных с помощью противоточного центрифугирования в элютриаторном роторе

Аннотация:

По своему клеточному составу красный костный мозг состоит из чрезвычайно гетерогенной популяции клеток, включающей стволовые клетки, клетки ретикулярной стромы и клетки пяти кроветворных ростков. Для клеточной терапии и экспериментальных исследований актуальной задачей является получение клеточных фракций костного мозга, обогащенных определенным типом клеток. B данной работе мы исследовали уровень экспрессии мРНК генов цитокинов во фракциях клеток костного мозга, изолированных с помощью противоточного центрифугирования в элютриаторном роторе. Фракционирование клеток выполняли при скорости вращения ротора 2500 об/мин. Отбирали шесть клеточных фракций (?): Ф-1 при скорости потока буфера 12 мл/мин, Ф-2 — 15 мл/мин, Ф-3 — 19 мл/мин, Ф-4 — 23 мл/мин, Ф-5 — 50 мл/мин, Ф-6 — собирали после остановки вращения ротора. Цитоморфологический анализ полученных фракций показал, что из общей популяции клеток в «легкой» фракции Ф-1 концентрируется 80% эритроцитов и 40% лимфоцитов, в Ф-2 — 44% лимфоцитов, 50% — полихроматофильных и 51% — оксифильных нормоцитов, в Ф-3 и Ф-4 — 70% нейтрофилов и 40% — эозинофильных гранулоцитов, в Ф-6 — 64% макрофагов, 95% — мегакариоцитов, 35% - ретикулярных и 62% — тучных клеток. Бластные клетки разных ростков кроветворения обнаружены преимущественно в Ф-5. C помощью RT-PCR максимальная экспрессия генов фактора стволовых клеток (Scf) и гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (Gm-csf) выявлена в «тяжелой» фракции Ф-6, фактора некроза опухолей (Tnfa) и эритропоэтина (Epo) — в Ф-4, Ф-5 и Ф-6, макрофагального колониестимулирующего фактора (M-csf) — в Ф-3 и Ф-4. Таким образом, данный метод позволяет эффективно отделить «легкие» фракции лимфоцитов и эритроцитов от основной массы клеток костного мозга, что может быть использовано при аллогенной трансплантации клеток костного мозгадляснижения риска развития острой реакции «трансплантат против хозяина». Другим важным преимуществом метода является возможность получить фракции «тяжелых» клеток, обладающих регенеративным потенциалом, с целью их использования в клеточной терапии для стимуляции восстановительных процессов в органах и тканях.

Авторы:

Издание: Медицинская иммунология
Год издания: 2026
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2026.-N 1.-С.109-116. Библ. 20 назв.
Просмотров: 1