Особенности экспансии и иммунофенотипа первичной культуры НК- и НКТ-клеток человека под действием различных активаторов пролиферации

Аннотация:

Экспансия натуральных киллеров (НК) и натуральных киллеров Т-клеток (НКТ-клеток) ex vivo является важной задачей при создании химерного рецептора антигена НК- и НКТ-клеток. Наиболее часто для экспансии лимфоцитов используют моноклональные антитела (МАТ) к CD (cluster of differentiation) 3- и CD28-рецепторам. Другими хорошо изученными Т-клеточными митогенами являются L-фитогемагглютинин (L-PHA) и конканавалин А (Соn-А). Перспективным, но малоизученным подходом представляется in vitro активация иммунных клеток полисахаридом фукозилированным хондроитинсульфатом (FCS), который выделен из морского огурца Cucumariajaponica и способен активировать иммунные клетки и стимулировать гемопоэз. Цель исследования - выявление оптимального способа активации НК- и НКТ-клеток в первичной культуре мононуклеарных клеток (МНК): МАТ к СDЗ- и СD28-рецепторам, L-PHA, Con-А, а также комбинации МАТ к CD3-и СD28-рецепторам и FCS. В качестве источника МНК человека использовали периферическую кровь и лейкоцитарно-тромбоцитарный концентрат. После выделения МНК проводили их активацию с помощью сорбированных МАТ к CD3- и СD28-рецепторам, L-PHA, Con-А или комбинации МАТ + FCS. Затем осуществляли культивирование лимфоцитов в присутствии интерлейкина 2, периодически оценивая прирост общего количества клеток, экспрессию поверхностных маркеров и цитотоксическую активность. В результате было показано, что L-PHA наиболее эффективно стимулировал деление Т-лимфоцитов (CD3+CD56 ) и НК-клеток (CD3+CD56+) относительно других режимов активации: доля клеток данных популяций после активации L-PHA была наибольшей. Con-А значительно стимулировал деление Т-хелперов (CD3+CD4+). При сравнении активации клеток под воздействием МАТ относительно L-PHA и Con-А наблюдался наибольший прирост количества НКТ-клеток (CD3+CD56+). Добавление FCS при стимуляции МАТ приводило к увеличению пролиферации лимфоцитов. Заключение. Таким образом, среди представленных способов активации МНК для стимуляции деления НК-и НКТ-клеток наиболее предпочтительным являлся способ активации МАТ + FCS, поскольку при этом наблюдался наибольший прирост общего количества клеток при максимальной доле СD56+-лимфоцитов, составляющей 58,9% к концу срока культивирования.

Авторы:

Издание: Российский биотерапевтический журнал
Год издания: 2025
Объем: 13с.
Дополнительная информация: 2025.-N 4.-С.64-76. Библ. 27 назв.
Просмотров: 1