Таргетная система доставки доксорубицина в клетки рака яичников на основе внеклеточных везикул плазмы и ДНК-аптамеров

Аннотация:

Эффективность системной цитостатической терапии онкологических заболеваний, включая рак яичников, ограничена токсическим повреждением здоровых тканей. Разработка технологий адресной доставки противоопухолевых препаратов является актуальной задачей. Одной из перспективных стратегий решения этой задачи стала разработка инновационных систем доставки на основе внеклеточных нановезикул (ВНВ), модифицированных ДНК-аптамерами. Цель. Разработка технологии модификации везикулярной мембраны ДНК-аптамером и оценка эффективности разработанной системы адресной доставки доксорубицина в клетки рака яичников in vitro. В исследовании были использованы образцы ткани перитонеальных метастазов рака яичников (n = 3) и клеточные линии Skov-З и Ovcar-З. ВНВ были выделены из плазмы здоровых доноров и исследованы с помощью анализа траекторий наночастиц (АТН) и проточной цитометрии. «Загрузка» доксорубицина (ДОКС) во ВНВ проводилась по разработанной ранее технологии сонопорации, очистка полученных комплексов ДОКС-ВНВ была проведена с помощью гель-фильтрации. Модификация везикулярной поверхности комплексов ДОКС-ВНВ осуществлялась за счет гидрофобного взаимодействия мембраны с холестеролом, ковалентно связанным с молекулой ДНК-аптамера. Оценка цитотоксичности разработанной системы доставки доксорубицина проведена с помощью МТТ-теста, В результате на первом этапе исследования, по литературным данным, были выбраны кандидатные аптамеры, проведена оценка их связывания с клетками рака яичника и выбран наиболее аффинный аптамер. На втором этапе исследования была разработана везикулярная система доставки доксорубицина, включающая: получение ВНВ из плазмы доноров методом ультрацентрифугирования, «загрузку» доксорубицина во ВНВ с помощью сонопорации, очистку полученных комплексов (ДОКС-ВНВ) от свободного доксорубицина с помощью гель-фильтрации и получение комплексов ДОКС-ВНВ-АПТ путем модификации поверхности ВНВ аптамером. В ходе заключительного этапа исследования проведен анализ цитотоксичности разработанной системы доставки ДОКС-ВНВ-АПТ, которая оказалась существенно выше цитотоксичности системы ДОКС-ВНВ 11% vs 57% выживших клеток линии Scov-3, 0,03% vs 0,3% выживших клеток линии Ovcar-3). Выводы. Наличие специфичного аптамера, конъюгированного с везикулярной поверхностью, повышало эффективность везикулярной системы доставки цитостатического препарата к клеткам рака яичников в условиях in vitro эксперимента. Разработка системы доставки противоопухолевых препаратов на основе ВНВ. модифицированных ДНК-аптамерами, представляется перспективной стратегией повышения эффективности системной химиотерапии.

Авторы:

Издание: Вопросы онкологии
Год издания: 2025
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2025.-N 6.-С.1370-1380. Библ. 21 назв.
Просмотров: 0