Иммобилизация красного флюоресцентного белка RFP с помощью модуля GW на пептидогликане молочнокислых бактерий Lactococcus Iaetis и Lactobaeillus acidophilus

Аннотация:

Введение. Пептидогликаны (ПГ) из молочнокислых бактерий являются безопасной платформой для систем поверхностного дисплея гетерологичных белков медицинского назначения. Прикрепление целевых белков к ПГ может происходить при участии белкового модуля GW. Цель: изучить возможность использования белковых модулей GW в качестве якоря для связывания различных белков с ПГ из молочнокислых бактерий. Материалы и методы. C помощью генно-инженерных методик получен продуцент модельного слитого белка GW-RFP. Белок выделен и очищен.ПГ молочнокислых бактерий выделены и использованы в реакции связывания с белком GW-RFP. Для контроля протекания реакции использованы методы световой и флюоресцентной микроскопии, электрофорез в полиакриламидном геле. Результаты. Отработаны методы выделения и очистки ПГ из Lactococcus Iactis и L. acidophilus. Клонирован и экспрессирован в Escherichia coli модельный белок GW-RFP, состоящий из красного флюоресцентного белка RFP и модуля GW, соответствующего первому GW-модулю белка AItA Staphylococcus aureus. Показано, что белок GW-RFP связывается с ПГ L. Iactis и L. acidophilus в количестве 24,9 ± 3,7 мкг белка/100 мкг сырого массы ПГ L. Iactis и 21,3 ± 3,3 мкг белка/100 мкг сырого веса ПГ L. acidophilus. Белок GW-RFP можно отделить от ПГ с помощью 0,5 M раствора NaCI. Заключение. Белковый модуль GW может служить якорем для белков, которые нужно иммобилизовать на ПГ, — как лактококков, так и лактобацилл.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2026
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2026.-N 1.-С.58-65. Библ. 22 назв.
Просмотров: 3