Взаимодействие лактоферрина, лизоцима и системы комплемента при моделировании реакций врождённого иммунитета in vitro

Аннотация:

Введение. Комплемент является ключевым гуморальным звеном иммунитета, участвующим в защитных и патологических процессах. Лизоцим человека (ЛЧ), лизоцим белка куриных яиц (ЛК) и лактоферрин (ЛФ) — классические компоненты врождённого иммунитета. Комплемент и белки врождённого иммунитета часто локализованы совместно, но их функциональное взаимодействие изучено недостаточно. Целью работы было охарактеризовать функциональное взаимодействие ЛФ и лизоцимов с комплементом. Материалы и методы. B качестве источника комплемента использовали сыворотку крови человека. B моделях классического и альтернативного путей комплемента использовали сенсибилизированные антителами эритроциты барана и эритроциты кролика соответственно. Уровень активации комплемента оценивали по гемолитической активности сыворотки, а также продукции анафилатоксинов, определяемых с помощью иммуноферментного анализа. Бактерицидное действие определяли методом подсчёта колоний. Проницаемость внешней и внутренней мембран Escherichia coli ML-35p изучали с использованием хромогенных субстратов периплазматических и цитоплазматических ферментов. Ферментативную активность лизоцима измеряли турбидиметрическим методом. Результаты. Мы подтвердили данные о том, что ЛФ избирательно ингибирует классический путь (MK50 ~ 160 мкг/мл; ~ 2 мкМ). Мы впервые продемонстрировали, что ЛЧ в высоких концентрациях (40—160 мкг/мл) умеренно усиливает активность классического и альтернативного путей комплемента (конвертацию белков C3, C5 и литическую активность), в то время как ЛК в концентрациях до 160 мкг/мл не влияет на активацию комплемента. ЛФ и ЛЧ модулировали классический путь независимо друг отдруга. ЛФ не предотвращал киллинг E. coli сывороткой, но несколько повышал жизнеспособность бактерий в разбавленной сыворотке. Лизоцимы кооперировали с комплементом в киллинге бактерий, но ЛФ частично предотвращал это взаимодействие в 5% сыворотке. ЛЧ и ЛК ускоряли лизис внутренней мембраны сывороткой независимо от присутствия ЛФ. Эти два фермента усиливали бактерицидное действие 50% сыворотки, причём при добавлении ЛЧ были отмечены несколько лучшие результаты, чем в присутствии ЛК. Заключение. ЛФ и ЛЧ оказывают противоположно направленное и независимое действие на комплемент. Мы уточняем представление о функциональном взаимодействии комплемента слизоцимом и предлагаем новую модель, в которой лизоцим взаимодействует с комплементом для ускорения киллинга бактерий за счёт усиления классического и альтернативного путей, а также синергизма с мембраноатакующим комплексом. ЛФ не ингибирует уничтожение бактерий сывороткой, но может противодействовать синергизму лизоцима и комплемента в разбавленной сыворотке.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2026
Объем: 15с.
Дополнительная информация: 2026.-N 1.-С.93-107. Библ. 40 назв.
Просмотров: 3