НЕИНДУЦИРОВАННЫЕ ОДНОНИТЕВЫЕ РАЗРЫВЫ В ДНК КЛЕТОК ЛИНИИ F9 ТЕРАТОКАРЦИНОМЫ МЫШИ

Аннотация:

Ранее нами было продемонстрировано наличие множественных однонитевых разрывов ДНК в норме в клетках доимплантационных зародышей мыши (стадия бластоцисты) (Patkin et al., 1994). Линия F9 тератокарциномы мыши по многим характеристикам напоминает клетки внутренней клеточной массы бластоцисты и способна к дифференцировке под действием ретиноевой кислоты (РК) и дибутирил-цАМФ (дб-цАМФ). С помощью реакции заполнения брешей и электрофореза ДНК отдельных клеток (метод ДНК-комет) мы продемонстрировали наличие множественных однонитевых разрывов ДНК в клетках линии F9 — недифференцированных и обработанных РК в течение 2 сут, но не в терминально дифференцированных клетках F9 и не в первичных эмбриональных фибробластах мыши. Ядерный белок Rad51, который специфически связывается с однонитевой ДНК, экспрессируется во всех клетках недифференцированной популяции Р9 и не экспрессируется в клетках дифференцированной популяции. Поскольку множественные однонитевые разрывы ДНК могут приводить к увеличению частоты сестринских хломатидных обменов (СХО), мы проанализировали уровень СХО в клетках F9. В недифференцированных клетках F9 уровень СХО составлял 9.6 ± 0.44 на 1 метафазу, что не превышает такового в клетках линии NIH ЗТЗ. Однако обработка РК в течение 48 ч приводила к достоверному повышению частоты СХО до 16.68 ± 0.72 на 1 метафазу, причем в ходе дальнейшей обработки РК уровень СХО вновь снижался до исходной величины. Поскольку наличие однонитевых разрывов в ДНК недифференцированных клеток F9 и в клетках бластоцист в норме не приводит к генетической нестабильности, мы считаем их естественным следствием быстро идущей репликации ДНК в этих клетках.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2000
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2000.-N 11.-С.1060-1068
Просмотров: 73