СТЕРЕОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВАКУОЛИЗАЦИИ Т-СИСТЕМЫ МЫШЕЧНЫХ ВОЛОКОН ЛЯГУШКИ, ВЫЯВЛЯЕМОЙ С ПОМОЩЬЮ КОНФОКАЛЬНОЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ МИКРОСКОПИИ

Аннотация:

Данные конфокальной флуоресцентной микроскопии использованы для количественной оценки обратимой вакоулизации Т-системы скелетных мышечных волокон лягушки, вызванной отмывкой 80—120 мМ глицерина. Волокна окрашивали мембранным зондом RH 414 и водорастворимым красителем флуоресцеин-декстраном, маркирующим содержимое вакуолей. С помощью морфометрических и стереологических методов измеряли объемную долю и удельную поверхность вакуолей на одиночных оптических срезах и на Z-сериях в течение 30-минутной отмывки глицерина. Различные методы измерения (трехмерная реконструкция вакуолей, компьютерная морфометрическая программа, наложение решетки), проведенные на одной и той же Z-серии, дали близкие результаты. Окрашенные RH 414 мембраны вакуолей имеют вид светлых колец шириной 0.3—0.4 мкм. Сделано заключение о том, что реальное положение мембраны вакуоли соответствует середине оболочки. Измерение по наружной границе оболочки ведет к существенному (до 50 %) завышению объемной доли и удельной поверхности вакуолей. В процессе обратимой вакуолизации объемная доля вакуолей возрастает и достигает через 20—30 мин. отмывки глицерина 10% (в контроле 0.3—0.4%). Таким образом, объем Т-системы может увеличиваться в 25—30 раз. Удельная поверхность вакуолей во время обратимой вакуолизации составляет 0.20— 0.35 мкм-1 и не превышает удельной поверхности нормальной Т-системы. Обсуждаются достаточность мембранного материала самой Т-системы для обратимой вакуолизации и роль геометрического фактора в этом явлении.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2000
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2000.-N 12.-С.1125-1133
Просмотров: 34