ИЗУЧЕНИЕ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ ИНГИБИТОРА ЦИКЛИНЗАВИСИМЫХ КИНАЗ p27/Kip В КЛЕТКАХ-ТРАНСФОРМАНТАХ ЕIА + ЕIВ19kДa И ЕIА + cHA-RasI РАЗЛИЧАЮЩИХСЯ ПО СПОСОБНОСТИ РЕАЛИЗОВАТЬ G1-БЛОК ПРИ СЫВОРОТОЧНОМ ГОЛОДАНИИ

Аннотация:

Исследована способность клеток-трансформантов Е1А+Е1В19кДа и Е1А+cHa-Ras, полученных из эмбриональных фибробластов крысы (ЭФК) путем введения в них различных пар комплементирующих онкогенов, осуществлять блок клеточного цикла на границе фаз G1/S после удаления из культуральной среды ростовых факторов сыворотки. Показано, что в условиях сывороточного голодания у трансформантов Е1А+Е1В19кДа клеточный цикл блокируется на границе фаз G1/S, как и у нормальных фибробластов, тогда как у трансформантов Е1А+cHa-Ras этого не происходит. Обнаружено, что содержание негативного регулятора прохождения по циклу ингибитора циклиновых киназ белка p27/Kip при трансформации не уменьшается. Сывороточное голодание в течение 24ч приводит к существенному повышению содержания белка p27/Kip в нормальных ЭФК и в трансформантах Е1А + Е1В19кДа, тогда как в трансформантах Е1А + cHa-Ras накопление ингибитора менее выражено. Согласно данным иммунофлуоресцентного анализа, ингибитор p27/Kip локализуется в ядре нормальных и трансформированных клеток, и сывороточное голодание не приводит к его инактивации перемещением в цитоплазму. Не обнаружено также взаимодействия ингибитора p27/Kip с онкобелками Е1А, которое в клетках ряда линий подавляет ингибирующее действие белка p27/Kip. Таким образом, показано, что известные способы инактивации ингибитора p27/Kip при трансформации клеток путем изменения его внутриклеточной локализации и взаимодействия с онкобелками в трансформантах Е1А+Е1В19кДа и Е1А+ cHa-Ras не работают. По-видимому, различная способность сравниваемых трансформантов осуществлять G1/S-блок в условиях сывороточного голодания определяется не только функционированием ингибитора p27/Kip, но и зависит от других, пока не идентифицированных клеточных событий.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2000
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2000.-N 12.-С.1148-1153
Просмотров: 21