КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ С ПОМОЩЬЮ ТВЕРДОФАЗНОГО КОНКУРЕНТНОГО РАДИОИММУНОАНАЛИЗА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ НАТИВНОГО АНТИГЕНА

Аннотация:

Антигенспецифические методы выявления антител широко используются в иммунохимии, серодиагностике инфекционных и паразитарных заболеваний, а также в гибридомной технологии. При наработке моноклональных антител (МКАТ) в асцитической жидкости (АЖ) мышей важно знать, сохраняется ли продукция МКАТ данным клоном in vivo и каково их содержание в АЖ. В зависимости от природы и физического состояния антигена, а также от особенностей практического использования МКАТ их содержание в АЖ может быть определено полуколичественно в титрах либо количественно в единицах массы на объем. Для антигенспецифического определения концентрации МКАТ используют два подхода — иммуноаффинное выделение МКАТ на антигенном сорбенте с последующим измерением в элюате концентрации белка или иммуноглобулина и количественный иммуноанализ, в основе которого лежит связывание МКАТ на иммобилизованном антигене. При проведении иммуноанализа для формирования твердой фазы необходим очищенный антиген, а для построения калибровочной кривой — очищенные МКАТ, идентичные тем, концентрация которых измеряется в данном образце АЖ. Возможным нежелательным последствием очистки МКАТ может быть снижение их антигенсвязывающей активности и в итоге — завышение измеренной концентрации МКАТ.

Авторы:

Издание: Иммунология
Год издания: 2001
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2001.-N 1.-С.60-63
Просмотров: 29