ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ РНК ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА С БЕЛКАМИ

Аннотация:

Связывание РНК вируса клещевого энцефалита (ВКЭ) с белками исследовали тремя методами: торможения в геле, сшивания при ультрафиолетовом (УФ) облучении и РНК-белкового блоттинга. Два клеточных РНК-связывающих белка с мол. массами приблизительно 30 и 22 кД обнаружены в ядерной фракции культур клеток почек свиньи (СПЭВ) и человека (RH), а также мононуклеарных клеток крови больных клещевым энцефалитом. Слабое взаимодействие исследуемой РНК с вирусными белками могло быть вызвано как следовыми количествами белков ВКЭ в зараженных клетках, так и необходимостью дополнительных факторов для связывания. Для увеличения количеств вирусных белков использовали бактериальные суперпродуценты и аффинную хроматографию при выделении нативных гликопротеинов. Показано, что очищенные белки Е и NS1 не взаимодействуют с вирусной РНК, а инкубация с рекомбинантным неструктурным белком NS3 ВКЭ приводит к сдвигу подвижности РНК ВКЭ в геле при отсутствии перекрестного сшивания под воздействием УФ-облучения в присутствии полианиона гепарина. Слабое связывание неструктурного белка NS3 ВКЭ с вирусной РНК основано на электростатическом взаимодействии. Олигорибонуклеотид длиной 14 нуклеотидных остатков, сответствующий 5'-концу генома ВКЭ, не взаимодействует с белком NS3, возможно, из-за малого размера или отсутствия необходимых последовательностей.

Авторы:

Издание: Вопросы вирусологии
Год издания: 2001
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2001.-N 2.-С.13-17
Просмотров: 29