РОЛЬ ОТДЕЛЬНЫХ АМИНОКИСЛОТНЫХ ОСТАТКОВ ИММУНОДОМИНАНТНОГО НЕПРЕРЫВНОГО ЭПИТОПА ЦИТОХРОМА Р450САМ (CYP101) 312LKKGDQ317 В РАСПОЗНАВАНИИ СПЕЦИФИЧЕСКИМИ АНТИТЕЛАМИ

Аннотация:

Ранее было показано, что участок бактериального цитохрома Р450саm (CYP101) 311-318 содержит иммунодоминантный непрерывный В-эпитоп. Для выявления роли отдельных аминокислотных остатков в связывании антител посредством пиновой технологии (Multipin™) синтезированы аналоги антигенного гексапептида 312LKKGDQ317 с единичными аминокислотными заменами в каждой позиции. Антитела из трех поликлональных кроличьих антисывороток против Р450сат характеризовались сходным взаимодействием с синтезированными пептидами. Показана важная роль остатка G315, любая замена которого приводит к падению связывания специфических антител до фоновых величин. Замены на другие аминокислотные остатки в позициях L312, КЗ 13 и D316 влияли на взаимодействие с антителами по разному; лишь некоторые замены были возможны без ущерба для связывания. Остатки КЗ 14 и Q317 оказались наименее существенными в плане взаимодействия с антителами. Полученные результаты соответствуют известным кристаллографическим данным по структуре молекулы Р450сат. В участке 312-317 этого белка полипептидная цепь делает поворот, так что доступные для воды атомы боковых групп КЗ 13 и D316, атом кислорода остова белковой цепи КЗ 14, Са-атом G315 образуют компактный поверхностный кластер - вероятный участок связывания иммуноглобулиновой молекулы. Боковой радикал КЗ 14, удаленный от этого кластера, не участвует во взаимодействии с антителом . Таким образом, непрерывный эпитоп 311-318 цитохрома Р450саm может быть признан конформационно-зависимым.

Авторы:

Издание: Вопросы медицинской химии
Год издания: 2001
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2001.-N 2.-С.248-254
Просмотров: 18