ИММОРТАЛИЗАЦИЯ ФИБРОБЛАСТОВ ЧЕЛОВЕКА ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ TSA -МУТАНТА SV40 И ПЛАЗМИДЫ PSV3NEO

Аннотация:

Под действием температурочувствительного мутанта (tsA 239) вируса SV40 и плазмиды pSV3neo получены клоны иммортализованных фибробластов человека, способные к длительному ведению в культуре и субклонированию. Показано, что по сравнению с исходными клетками выделенные клоны обладают высокой эффективностью посева клеток на субстрате, уменьшением длительности времени удвоения популяции клеток и способностью расти в среде с малым содержанием сыворотки. При изучении роста иммортализованных клеток в среде с полужидким агаром не наблюдалось образования колоний, и это указывает на то, что клетки не полностью малигнизировались, так как рост в агаре является одним из наиболее типичных признаков злокачественных клеток. ПЦР (полимеразная цепная реакция)-анализ иммортализованных клеток, полученных путем инфицирования диплоидных фибробластов tsA SV40, показал присутствие вируса на ранних пассажах (25п) и отсутствие его на более поздних (46п) после трансфекции. ПЦР-анализ клеток клонов, выделенных после трансфекции плазмидой pSVSneo, обнаружил присутствие последовательностей гена А как на ранних (9—15п), так и более поздних (62п) пассажах. Экспрессия продукта гена А — Т-антигена — в клетках этих клонов была выявлена только на относительно ранних пассажах (11п и 35п). В работе обсуждаются возможные механизмы возникновения иммортализованного фенотипа в диплоидных клетках человека после воздействия ts-мутанта вируса SV40 и его конструкций.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2001
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2001.-N 10.-С.944-952
Просмотров: 88