КОНСТИТУТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ МАР-КИНАЗНЫХ КАСКАДОВ В КЛЕТКАХ REF, ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ ОНКОГЕНАМИ E1A И cHa-ras

Аннотация:

Белки семейства Ras играют ключевую роль в регуляции пролиферации и роста клеток, и их мутации могут приводить к независимому от ростовых факторов размножению клеток благодаря нерегулируемой активации сигнальных киназных каскадов. В настоящей работе мы исследовали уровень активности МАР-киназных каскадов в эмбриональных фибробластах крысы (REF), трансформированных онкогенами Е1А и cHa-ras; такие трансформированные фибробласты характеризуются высокой и нерегулируемой ростовыми факторами активностью транскрипционного фактора АР-1. Поскольку фосфорилирование этого фактора зависит от уровня активности различных МАР-киназных каскадов — ERK, JNK и р38, изучено содержание нефосфорилированных киназ и их фосфорилированных форм в клетках Е1А + cHa-ras. Установлено, что в трансфомированных клетках содержится больше нефосфорилированных форм всех трех киназ, что, вероятно, отражает сниженную деградацию этих и ряда других белков в трансформантах. Содержание фосфорилированных (активных) форм киназ pERK, pJNK и рр38, исследованное с помощью фосфоспецифических антител, также выше в экспоненциально растущих клетках-трансформантах, однако стимуляция голодающих трансформантов сывороткой дополнительно не стимулирует фосфорилирование киназ. Уровень активности киназ, тестируемый с помощью реакции фосфорилирования специфических субстратов in vitro, в целом соответствует картине, полученной с помощью фосфоантител. Однако этот метод позволил выявить некоторую стимуляцию активности c-Jun-ассоциированных киназ (JNK) и МЕF2А-ассоциированных киназ (р38) в клеткахтрансформантах при действии сыворотки. Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что введение в фибробласты онкогенного Ras приводит к конститутивной активации киназных каскадов ERK, JNK и р38, что, вероятно, определяет высокий и нерегулируемый уровень зависимых от них транскрипционных факторов, в частности фактора АР-1.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2001
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2001.-N 10.-С.961-967
Просмотров: 46