TNFAЛЬФА-ИНДУЦИРОВАННЫЙ ПЛАЗМАМЕМБРАННЫЙ СИНТЕЗ АТР В ЛИМФОЦИТАХ И ЕГО ВОЗМОЖНАЯ РОЛЬ В ПЕРЕДАЧЕ СИГНАЛА АПОПТОЗА В НОРМЕ И ПРИ ГНОЙНОЙ ХИРУРГИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ

Аннотация:

Исследования, проведенные ранее, показали, что плазматические мембраны Т-лимфоцитов при действии фактора некроза опухолей альфа (TNFa) способны синтезировать некоторое количество АТР. Предполагалось, что этот плазмамембранный синтез АТР является следствием трансмембранной передачи лиганд-рецепторных сигналов и необходим для активации лимфоцитов. В данной работе исследована связь TNFaльфа-индуцированного плазмамембранного синтеза АТР с изменением структуры ядерной ДНК, которое наблюдалось в Т-лимфоцитах при действии на них TNFa. Плазмамембранный синтез АТР наблюдался при инкубации препаратов, обогащенных плазматическими мембранами, в среде, содержащей все компоненты аэробного фосфорилирования и TNFa. Количество синтезированного АТР определяли люциферин-люциферазным методом. Параллельно определяли количество однонитевых разрывов ДНК. Для этого использовали ступенчатый щелочной гидролиз ДНК с последующей окраской бромистым этидием и флюоресцентным определением количества ДНК, оставшегося в двунитевой форме. Накопление однонитевых разрывов ДНК в данном исследовании являлось критерием вхождения Т-лимфоцитов в стадию апоптоза. Установлено, что TNFa опосредует как плазмамембранный синтез АТР, так и накопление значительного количества однонитевых разрывов ДНК в ядрах Т-лимфоцитов. Доксорубицин полностью ингибирует TNFa-индуцированный плазмамембранный синтез АТР и значительно снижает количество однонитевых разрывов ДНК, которые индуцирует TNFa. Параллельные исследования количества однонитевых разрывов ДНК и hTNFa-стимулированного плазмамембранного синтеза АТР в лимфоцитах, изолированных из периферической крови больных с различными формами гнойной хирургической инфекции, выявили, что оба показателя превышают норму, установленную для доноров. В Т-лимфоцитах, изолированных непосредственно из очага воспаления, на фоне большого количества однонитевых разрывов ДНК наблюдалось снижение уровня плазмамембранного синтеза АТР. Полученные результаты позволяют предположить, что плазмамембранный синтез АТР и появление однонитевых разрывов ДНК связаны между собой и являются компонентами единого механизма, приводящего клетку к апоптозу.

Авторы:

Издание: Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии
Год издания: 2002
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2002.-N 2.-С.27-32
Просмотров: 23