НОВЫЙ КЛЕТОЧНЫЙ БЕЛОК ЧЕЛОВЕКА AUP1. I. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С АДЕНОВИРУСНЫМИ БЕЛКАМИ E40RF3 И ЕIА IN VITRO

Аннотация:

Белковый продукт четвертой ранней транскрипционной единицы аденовируса (Е4) E40RF3 с мол. массой 11 кДа участвует во многих процессах, происходящих в инфицированной клетке, в том числе в посттранскрипционной регуляции экспрессии поздних вирусных генов и синтезе вирусной ДНК. Кроме того, E40RF3 аденовируса пятого типа (Ad5) был описан как вирусный онкопротеин. При кооперации с FI-генами Ад5 он повышает эффективность трансформации культивируемых клеток грызунов и увеличивает способность к полной трансформации клеток, экспрессирующих ЕI. Однако биохимические механизмы участия E40RF3 в этих процессах остаются неизученными. Большое количество исследований показало, что функции вирусных белков в процессе трансформации и на литической стадии инфекции опосредованы физическим взаимодействием с клеточными и вирусными белками, участвующими в транскрипции и репарации ДНК, и клеточными белками, реорганизующими ядерные мультибелковые образования, так называемые PML-онкогенные домены (POD). С помощью двухгибридной дрожжевой системы мы обнаружили 15 кДНК человека, кодирующих белки, способные связываться с E40RF3. 5 из них кодируют клеточный белок AUP1. Исследование in vitro взаимодействия AUP1, сплавленного с глютатион-S-трансферазой (GST), с E40RF3 показало, что AUP1 специфично взаимодействует in vitro с E40RF3 Ad5, Ad9 и Ad40, транслированными in vitro, однако не связывается с E40RF3 Adl2. Особый интерес представляет то, что GST—AUP1 способен высокоаффинно связываться с транслированным in vitro El A Ad5. Сайты взаимодействия белков in vitro были картированы в центральной части E40RF3 и карбокситерминальном участке AUP1, в то время как Е1А связывается с аминотерминальной частью клеточного белка. Таким образом, показано, что AUP1 может являться клеточной мишенью для обоих аденовирусных белков E40RF3 и Е1А. Продолжающиеся исследования могут выявить значение этого взаимодействия в живых клетках.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2002
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2002.-N 9.-С.830-838
Просмотров: 17