ПОЛУЧЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ФЛЮОРЕСЦИРУЮЩИХ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ К V CHOLERAE 0139-СЕРОВАРА

Аннотация:

Появление в 1992 г. нового возбудителя холеры, не вступающего в серологические реакции с холерной 01-сывороткой, в силу индивидуальной структуры ЛПС потребовало разработки новых диагностических препаратов. В настоящее время в лабораторной практике единственным методом диагностики является серологическая идентификация выделенных культур в слайд — агглютинации с использованием холерной агглютинирующей сыворотки к V. cholerac 0139-серовара. В технологическом процессе получения этой сыворотки процедура адсорбции ее клетками вибрионов V.cholerae 022 и RCA-385, имеющих антигенное родство с V. cholerae 0139, приводит к значительному снижению количества специфических иммуноглобулинов. В последние годы появились работы, из которых следует, что обнаружены другие микроорганизмы: V. cholerae 0155 , V. mimicus 1990 , Aeromonas trota , E. coli 055, Salmonella greenside , вступающие в реакцию с диагностической сывороткой 0139, в связи с чем возникают определенные трудности в идентификации холерных вибрионов 0139-серогруппы имеющимися диагностическими препаратами. Т. В. Аленкина и соавт. сообщили о возможности создания диагностических флюоресцирующих иммуноглобулинов на основе моноварной кроличьей холерной агглютинирующей сыворотки 0139. В то же время неоднократная адсорбция антисыворотки к V. cholerae 0139 микробными клетками различных штаммов существенно снижает ее титр в отношении специфических иммуноглобулинов и усложняет процесс приготовления диагностических люминесцирующих антител 0139. За рубежом уже в 1994—1995 г. были созданы гибридомы — продуценты моноклональных антител (МКА), направленных к эпитопам полисахаридных антигенов возбудителя холеры 0139. На основе МКА были разработаны диагностические тест-системы, в частности SMART-Bengal-тест для выявления вибрионов 0139 в стуле больных . С помощью 2 МКА J. Hasan и соавт, создали диагностический набор, включающий реагенты для реакции коагглютинации и прямой иммунофлюоресценции. Препараты МКА, меченных ФИТЦ, отличались высокой специфичностью и чувствительностью, выявляя холерные вибрионы 0139-серогруппы в пробах, содержащих 1.5- 102 клеток в 1 мл. Сведения о МКА к V. cholerae 0139 в публикациях отечественных авторов отсутствуют. Нами была проведена работа по получению МКА к ЛПС возбудителя холеры 0139-серовара. Оценка активности МКА в реакциях агглютинации, иммуноферментном анализе (ИФА), дот-ИФА, непрямой иммунофлюоресценции на штаммах холерных вибрионов 0139, имеющихся в институте, показали их строгую специфичность и отсутствие перекрестных реакций с антигенно-близкими микроорганизмами. Учитывая нынешнюю ситуацию по холере, качество и набор диагностикумов, используемых при проведении серологического анализа культур холерных вибрионов, актуальным и практически значимым представляется создание новых препаратов, способствующих повышению эффективности лабораторной диагностики холеры. Целью данной работы является разработка и получение иммуноглобулинов диагностических флюоресцирующих к V. cholerae 0139 на основе МКА.

Авторы:

Издание: Клиническая лабораторная диагностика
Год издания: 2002
Объем: 2с.
Дополнительная информация: 2002.-N 12.-С.50-51
Просмотров: 126