ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА ЦИТОХРОМА CYP51 MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS В ESCHESICHIA COLI

Аннотация:

Стерол-14а-деметилаза CYP51 Mycobacterium tuberculosis в настоящее время рассматривается как одна из перспективных мишеней для противотуберкулезных препаратов нового поколения. По аналогии с эукариотическими стерол-14а-деметилазами, в качестве селективных ингибиторов CYP51 М. tuberculosis (MT CYP51) предполагается использовать препараты группы азолов, представляющие собой N-замещенные производные имидазола и триазола. Для первичного скрининга веществ данной группы in vitro по критерию специфического сродства к белковой мишени нами была сконструирована высокоэффективная система гетерологичной экспрессии MT CYP51 в Е. coli. Рекомбинантный белок выделяли металлоаффинной хроматографией; его выход составил около 1,5 мкмоль на 1 л культуры. Было показано, что рекомбинантный белок взаимодействует с кетоконазолом с константой диссоциации 7,7 мкМ, соответствующей описанной в литературе. Таким образом, рекомбинантный белок MT CYP51, полученный с помощью разработанной нами системы экспрессии в Е. coli, может быть использован для тестирования новых антимикобактериальных препаратов, создаваемых на основе азолов.

Авторы:

Издание: Биомедицинская химия
Год издания: 2003
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2003.-N 2.-С.145-152
Просмотров: 33